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《微生物学实验》教学大纲
一、实验目的
微生物学是一门实践性、技术性很强的课程，微生物学实验的方法是根据微生物独特的形态、生理、繁殖特征设计的。因此，开好实验课是全面掌握该课程的重要环节。该课程的目的：训练学生掌握微生物学最基本的操作技能；进一步了解、深化微生物学的基本理论，加深理解课堂讲授的有关微生物学理论知识，同时通过实验，培养同学观察、思考、分析问题和解决问题的能力，实事求是，严肃认真的科学态度，以及勤俭节约的优良品质。
二、实验内容
实验课计划学时为36～54学时，内容如下：
实验一
灭菌器皿的准备及空气中细菌群体的认识
1、目的和要求：
了解微生物学实验技术的特殊性，以及进行实验的必备条件；
比较不同场所细菌的数量；
体会无菌操作的重要性。
2、实验内容：（共3个实验内容）
灭菌器皿的准备；
蒸熏实验室；
不同环境空气中细菌数量的测定。
实验二
显微镜使用、细菌单染色及革兰氏染色
1、目的和要求：
学习并掌握油镜的使用方法；
学习并掌握对细菌进行涂片染色的方法；
学习无菌操作技术。
2、实验内容：（共3个实验内容）
显微镜油镜的使用；
细菌的单染色；
细菌的革兰氏染色。
实验三
细菌特殊结构观察及显微测微技术
1、目的和要求：
学习并掌握测量微生物大小的基本方法；
掌握悬滴法观察细菌运动的基本技术；
学习并掌握芽孢染色法和荚膜染色法；
观察细菌群体形态的特征。
2、实验内容：（共5个实验内容）
显微镜测微技术；
细菌的芽孢染色；
细菌运动性观察；
细菌的荚膜染色；
细菌群体形态的观察。
实验四
放线菌、霉菌形态观察
1、目的和要求：
掌握放线菌、霉菌的制片技术；
认识常见的放线菌、霉菌的个体形态和群体形态结构。
2、实验内容：（共4个实验内容）
放线菌群体形态观察；
霉菌群体形态观察；
放线菌个体形态观察；
霉菌个体形态观察。
实验五
酵母菌形态观察和微生物直接计数法
1、目的和方法：
观察酵母菌的细胞形态及出芽生殖方式；
学习并掌握酵母菌子囊孢子的观察方法；
学习并掌握区分酵母菌死活细胞的染色方法；
学习使用血球计数板进行微生物计数的方法；
学习并掌握比浊法进行微生物计数的方法。
2、实验内容：（共4个实验内容）
酵母菌菌落观察；
酵母菌个体形态观察；
显微镜直接计数法；
比浊计数法；
实验六
培养基配制及干湿热灭菌
1、目的和要求：
掌握配制培养基的方法步骤，分别配制适合于细菌、放线菌、霉菌的各种培养基；
掌握干热灭菌和湿热灭菌的原理和操作方法。
2、实验内容：（共6个实验内容）
肉汤蛋白胨培养基的配制；
高氏1号培养基的配制；
马丁氏培养基的配制；
伊红美兰培养基的配制；
培养皿、玻璃刮铲、移液管等的包装和棉塞制作；
干热灭菌与湿热灭菌。
实验七
从土壤中分离微生物
1、目的和要求：
建立严格的无菌操作概念，掌握无菌操作技术；
学习并掌握从自然界分离各类微生物的原理和基本操作技能。
2、实验内容：（共4个实验内容，需二次完成）
土壤稀释液的制备；
稀释涂布平板法；
平板划线分离法；
稀释混合平板法。
实验八
生长谱法测定微生物营养要求
1、目的和要求：
学习生长谱法测定微生物营养要求的基本原理和方法。
2、实验内容：
生长谱法测定微生物的营养要求。
实验九
理化因素对微生物的影响
1、目的和要求：
了解常用化学药品对微生物的作用；
了解紫外线对微生物的作用；
了解抗生素对微生物的影响并学习抗菌谱试验的基本方法。
2、实验内容：（共3个实验内容，需二次完成）
紫外线的杀菌力；
六种化学药品的杀菌作用；
抗生素对微生物的影响。
实验十
不同微生物生理生化反应测定
1、目的和要求：
了解不同细菌代谢产生的生理生化反应的多样性。
2、实验内容：
糖发酵实验；VP实验；甲基红反应；H2S反应。
实验十一
噬菌体的分离和纯化
1、目的和要求：
学习从自然环境中分离、纯化噬菌体的基本原理和方法；
学习噬菌体效价测定的基本方法。
2、实验内容：（共3个实验内容，需三次完成）
噬菌体的分离；
噬菌体的纯化；
噬菌体效价的测定。
实验十二
细菌的接合作用
1、目的和要求：
了解细菌接合导致遗传重组的原理；
学习细菌接合实验的基本方法。
2、实验内容：（共1个实验内容，需二次完成）
细菌的接合实验；
实验十三
水的细菌学检查（一）
1、目的和要求：
以水的细菌学检查为例，了解对食品、饮料的卫生检测原理、方法；
2、实验内容：（共2个实验内容，）
采取水样；
发酵培养。
实验十四
水的细菌学检查（二）
1、目的和要求：
掌握细菌总菌数测定方法；
多管发酵法；
2、实验内容：（共2个实验内容，需二次完成）
进一步鉴别水中大肠菌的存在数量，并进行水中细菌技术；
革兰氏染色、复发酵，完成检验结果。
实验十五 实验技能综合测试
1、目的和要求：
在给定时间内要求每一位学生把本课程的基本操作技能和实验方法做一个综合的显示；
检查学生独立设计实验及独立操作动手能力，根据实验结果，公平打分，以检查整体教学效果。
2、实验内容：
涵盖本学期实验课所学的全部内容，分两部分进行考核完成。
[注]：实验课计划学时为36学时，实验十、十一、十二内容不做。
实验课计划学时为54学时，增加上述内容。
三、实验学时安排
序号
实验名称
周次
学时
实验性质
实验一
灭菌器皿的准备及空气中细菌群体的认识
3 2学时
验证性
实验二
显微镜使用、细菌单染色及革兰氏染色
4 3学时
验证性
实验三
细菌特殊结构观察及显微测微技术
5 3学时
验证性
实验四
放线菌、霉菌形态观察
6 3学时
验证性
实验五
酵母菌形态观察和微生物直接计数法
7 3学时
验证性
实验六
培养基配制及干湿热灭菌
8 4学时
验证性
实验七
从土壤中分离微生物
9,10 5学时
综合性
实验八
生长谱法测定微生物营养要求 11
3学时
验证性
实验九
理化因素对微生物的影响
12 3学时
验证性
实验十
不同微生物生理生化反应测定
13 4学时
验证性
实验十一
噬菌体的分离和纯化
14 6学时
综合性
实验十二
细菌的接合作用
15 6学时
验证性
实验十三
水的细菌学检查（一）
16 2学时
综合性
实验十四
水的细菌学检查（二）
17 3学时
综合性
实验十五
实验技能综合测试
18 4学时
四、考试方式
实验课成绩占全课程30%，其中，平时成绩18分（包括课堂提问5分，平时操作4分，课堂纪律2分，课堂卫生1分，实验报告6分），期末实验课考试12分，共30分
五、教材与参考书目
教材：
沈萍，范秀荣等主编：微生物学实验（第三版），高等教育出版社，1999，6
参考书目：
周德庆主编：微生物学实验手册，上海科技出版社，1986，12
执笔人：朱宏莉
审定人：黄建新 |
